List of Assays

Zellfreie Assays

 

Methodologie

 

Absorption = Abs, Fluoreszenz = FI, Fluoreszenzpolarisation = FP, Zeitaufgelöste Fluororeszenz = TRF, Fluoreszenzresonanzenergietransfer = FRET

Verwendungszweck: Bestimmung der kinetischen Parameter wie Km, Vmax, usw.; IC50; Screening mit niedrigem, mittlerem und hohem Durchsatz

Assay

Enzymatische Analysen

Enzymatische Essays für:

Kinases (PKC alpha)

TRF

Proteases (HIV1 Protease, Cathepsin B)

FRET, IQF

Kleine G-Proteine; Beispiele: Protein Gq, Rac

FP

ELISA

Phosphodieasterasen (PDE V) Phosphodieasterasen (PDE V)

FP

Verwendungszweck: Liganden-, Agonisten und Antagonistenbindung: IC50-Bestimmung für Inhibitoren

Metabolische Enzyme

Abs

ECM (Collagenase, Transglutaminase)

G-protein

FP

Adenylatzyklase

FAAH

FI

FI

Biliverdinreduktase

FP

Östrogenrezeptoren

FP, TRF

Trimerische G-Proteine

Rezeptoren 

Rezeptoraktivitäten

hCGbeta, hFc, MCP1, Insulin

Collagen

HRP

FP

Immunassays

Verwendungszweck: Entwicklung von Assays für die Interaktionen zwischen Proteinen, Probenvorbereitung, Antikörpercharakterisierung

RIPA

Zellextraktionen 

Proteindetektion

SDS-PAGE, WB

Proteomics

Proteinquantifizierung

Bradford, Lawry, BCA

FRET-TRF

ELISA

Beispiel II

Beispiel I

Protein-Protein-Interaktionen

Phosphorylierung und Dephosphorylierung in vitro

Entsprechend dem ausgewählten Assay 

ELISA, W.B.

Antigendetektion in Proben

Ligandenproteininteraktion

Inhibition in Bindungs-Assays 

Wettbewerbsbasierte Bindungsassays 

Bindungs-Assays

IP&W.B., FRET, HTRF, alpha screen, FP

IP&W.B., FRET, HTRF, alpha screen, FP

FRET, HTRF, FP

ELISA, W.B., FACS, IP

Detektion von zytoplasmischen, nuklearen, Membran- und Zytoskelettproteinen

Fluorophor-Markierung von Proteinen und Peptiden

Fluoreszein, Biotin

Alexa-fluor

Aufreinigung der Markierungspeptide durch Auftragsforschungsunternehmen

Aufreinigung von Markierungsproteinen in PD10

Western Blotting 

Probenvorbereitung für Western Blotting

Probenvorbereitung für quantitatives Western Blotting

Tricin-SDS-Gels

Elektrophoretische Trennung 

Elektrophoretische Trennung für Quantitatives Western Blotting 

Transfer: iBlot, trocken/halbtrocken/Nasstransfer

Quantitatives Western Blotting 

Entwicklung von Western Blots mittels chromogener ECL-Methoden

Entwicklung von Western Blots mit wissenschaftlichem Bildgebungsfilm 

Abs, Fl, FP, TRF und andere...

FP

Chemiluminescence

Proteomic profiling

Visualisierung von Western Blots auf Kodak Image Station Bildgebungsfilm 

Compound Characterization

Solubility

Fluorescence Spectroscopy

Abs

3D FI

3D FI

Protein - Peptide/Nucleic acids/Small molecule Interaction 

FP, ELISA

FP

Nucleic acids quantification

Biophysical assays

Thermal shift

Protein-small molecule

Other

In-vitro transcription/translation

FRET in confocal microscopy

 

Zellbasierte Assays

Zellbanklagerung möglich

Züchten, Einfrieren, Auftauen und Verpacken unterschiedlicher Zelllinien

Zellextraktionen und Proteindetektion: 

Vorbereitung von Proteinganzzellextrakten für die quantitative Gelanalyse

Siehe: Zellfreie Assays

P2-Einrichtungen ermöglichen verschiedene Zellkulturaktivitäten

Gewebekultivierungsmethoden

Gewebekultivierungsmethoden

Züchten und Lagern von Zellen

Gewebekultur

Methodologie

Assay

Potenz-Assays

Proliferation/Aktivierung/Apoptose

Beispiel: Proliferation von Lymphknotenzellen 

BRDU

Toxizitäts-Assays

Zellviabilität, Zytotoxizität, verankerungsabhängiger Zelltod und Zellseneszenz

Angiogenese-Assay

Verwendung von ECM-Matrixgel

WST1, MTT, XTT, Annexin CY3, Zelltiterglo

Autophagie - ein lysosomaler Abbaumechanismus für zytoplasmisches Material, wird bei Zellstress aktiviert

Zelladhäsion und -anbindung

Beispiel: Fibroblasten-Anbindungs-Assay 

Cell Biolabs kits 

Zwei Formen von LC3 können vom Western Blot erkannt werden

Zellmigration: Chemotaxis, Haptotaxis, Transmigration, Wundheilung

Beispiel: Transwell mit mcp1 als chemischem Lockstoff

Matrigel, Transwell + WST1

MTT, XTT, WST1, WST3, IL2 (T Zellen)

Cell Biolabs kits 

CytoSelect™ ECM Zelladhäsions-Assays (Cell Biolabs) 

Glukoseaufnahme in 3T3-L1

Induktion der Zelldifferenzierung (z.B. L1 Prä- Adipozyten bis differenzierte Adipozyten 

Induktionsmethoden

Interleukine, TNF, Wachstumsfaktoren…

Zellaktivierung und -proliferation

Folatrezeptorbindung in KB-Zellen

Proliferation mit rekombinanten Humanproteinen behandelter Fibroblasten (CRL2522) und Endothelzellen

Tgase-Aktivität

Zellaktivierung gemessen durch Ca++ Zustrom

Ektopische Proteinexpression in Bakterien- und Säugetierzelllinien

Zellzyklusvon Zelloberflächenrezeptoren und Antigenen

Erkennung von Zelloberflächenrezeptoren und Antigenen

Trimeres G-Protein über forskolininduziertes cAMP

FACS, ELISA

Propidiumjodid (PI) rot in FACS

Transfektionen, Transformationen

ELISA

Zellsignalisierung

Bindungs-Assays

Säugetier-Zwei-Hybrid

IP-WB, ELISA

Protein-Protein-Interaktion

 Cell Biolabs kits 

Gene expression/quantification

mRNA, RNA, miRNA, siRNA, DNA and RNA-Plex

Immunological assays

Isolation of PBMCs from whole blood

Gravity Sedimentation

Magnetic separation

T Cell enrichment

T Cell Activation/Expansion

CD3+CD28 antibodies

Inflamation assays

Andere

Confocal microscopy

Lenti-viral particles

 

Spezielle Antikörper

Verwendungszweck: Liganden-, Agonisten und Antagonistenbindung: IC50-Bestimmung für Inhibitoren.  

Insulin, Calcitonin

Bioassays

Specific Assays

Assay / Aktivität

Methodology

Methodology

Detektion von Peptiden in Serum

Absorption nach HRP

Detektion von Antikörpern in Serum

Menschliches Fc aus aufbereitetem Medium

HRP

ELISA-HRP

Cytokines

Detektion von Zytokinen in Serum

Spezielle Proteine

Durchdringung der Blut-Hirn-Schranke

Extraktion von Evans Blau/ Fluoreszein und markierten Proteinen aus Rattenhirn

Fluoreszenz/Absorption

Insulin, Calcitonin

Early in vitro ADMETox

 

Assay 

Methodology

Absorbtion

Intestinal absorbtion

Caco2 cells

Absorption

Intestinal absorption

Caco2 cells

Distribution

Binding to plasma proteins

FP

Metabolism

Metabolic Stability

Microsomes, Hepatocytes

Microsomes

Esterases metabolism

Recombinant CYP450 isozymes

CYP-Inhibition

CYP-Induction

mRNA

Toxicity

Cytotoxicity

WST1-viability assay

Cardiotoxicity

Binding assay-FP

Contact

smart@assays.co.il

 

Tel: +972 (0)77-300-1087

Mobil: +972 (0)54-7241-251

Location

3 Pinchas Sapir St.,

Weizmann Science Park

Ness Ziona,

7414003 ISRAEL

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