Liste d’essais

Essais acellulaires

 

Méthodologie

 

Absorbance = Abs, Fluorescence= FI, Polarisation de fluorescence = FP, Fluorescence résolue dans le temps = TRF, Transfert d’énergie de fluorescence par résonance = FRET

Usage prévu : Détermination des paramètres cinétiques tels que le Km, la Vmax, etc.; IC50; Faible, Moyen et Haut tout au long du criblage.

Essai

Essais enzymatiques

Essais enzymatiques pour:

Kinases (PKC -α)

TRF

Protéases (protéase du VIH-1, cathepsine B)

FRET, IQF

FP

ELISA

Phosphodiéastérases (PDE V)Phosphodiestérases(PDEV)

FP

Usage prévu : Ligand, liaison d’agoniste et d’antagoniste : Calcul de la valeur de Kd, Bmax, EC50 et IC50 pour les inhibiteurs.  

Enzymes métaboliques

Récepteurs

Abs

ECM (collagénase, transglutaminase)

Protéine G

FP

Adénylate Cyclase

FAAH

FI

FI

Biliverdine réductase

FP

Récepteurs d’œstrogène

FP, TRF

Protéines G trimériques

Activités du récepteur

Usage prévu : réaliser des essais visant à étudier les réactions protéine-protéine, la préparation d’échantillons, la caractérisation d’anticorps.

hCGbeta, hFc, MCP1, Insulin

Collagène

HRP

FP

Essais immunologiques

RIPA

Extractions de cellules

Détection de protéine

SDS-PAGE, WB

Protéomique

Quantification de l’expression des protéines

Bradford, Lawry, BCA

FRET-TRF

ELISA

Exemple II

Exemple I

Interactions protéine-protéine

Phosphorylation et dé-phosphorylation in vitro

Selon l’essai choisi

ELISA, W.B.

Détection d’antigènes dans les échantillons

Interaction ligand protéine

Inhibition dans les études de relations

Études de relations par compétition

Études de relations

IP&W.B., FRET, HTRF, alpha screen, FP

IP&W.B., FRET, HTRF, alpha screen, FP

FRET, HTRF, FP

ELISA, W.B., FACS, IP

Détection de protéines cytoplasmiques, nucléaires, membrane et cytosquelette

Marquage au fluorophore des protéines et des peptides

Fluorescéine, biotine

Alexa-fluor

Marquage et purification de peptides par CRO

Marquage et purification des protéines sur une colonnePD10

Transfert de protéines

Préparation d’échantillons pour le transfert de protéines

Préparation d’échantillons pour le transfert de protéines quantitatif

Gels tricine SDS

Séparation électrophorétique

ESéparation électrophorétique pour le transfert de protéines quantitatif

Transfert : iBlot, transfert, sec/semi-sec/humide

Buvagardage de western quantitatif

Développement de transfert de protéines en appliquant les méthodes de détection améliorée de la chimiluminescence (enhanced chemiluminescent, ECL), chromogéniques

Développement de transfert de protéines avec un film d’autoradiographie

Visualisation de transfert de protéines sur la station d’image de Kodak 

Abs, Fl, FP, TRF, et plus

Caractérisation composé

Solubilité

Fluorescence Spectroscopy

FP

Abs

3D FI

Chemiluminescence

Profilage protéomique

3D FI

Protéine - Peptide/ acides nucléiques / Petit Interaction molécule

FP, ELISA

FP

La quantification des acides nucléiques

Essais Biophysiques

Décalage thermique

Protéine - molécule organique

Autre

In-vitro transcription/raduction

FRET en microscopie confocale

Petites protéines G ; exemples : Protéine Gq,Rac

 

Essais cellulaires

Conservation dans une banque cellulaire disponible

Culture, congélation, décongélation et conditionnement de différentes lignées cellulaires.

Extractions de cellules et détection de protéines: 

préparation de souches d’une cellule entière de protéine pour l’analyse quantitative d’un gel.

Voir: Essais acellulaires

Installation P2 permettant diverses activités de culture des tissus.

Méthodes de culture des tissus.

Méthodes de culture des tissus.

Culture et conservation de cellules.

Culture de tissus

Méthodologie

Essai

Essais d’activité biologique

Prolifération/activation/apoptose

Exemple : prolifération de cellules ganglionnaires

BRDU

Essais de toxicité

Viabilité des cellules, cytotoxicité, mort des cellules dépendant d’un support et sénescence cellulaire

Essai d’angiogénèse

Utiliser le gel de matrice extracellulaire

WST1, MTT, XTT, Anexcin CY3, Cell titer glo…

Voie de dégradation lysosomale pour le cytoplasme et est activée durant le stress cellulaire

Adhérence et fixation des cellules

Exemple : Essai de fixation du fibroblaste

Kits Cell Biolabs 

Deux formes de LC3 peuvent être observés par transfert de type Western

Migration de cellules : Chimiotactisme, haptotactisme, transmigration, cicatrisation des plaies

Exemple : Insert de culture Transwell en utilisant le ligand CCL2 comme facteur chimiotactique

Matrigel, Transwell + WST1

MTT, XTT, WST1, WST3, IL2 (cellules T)

Kits Cell Biolabs  

Essais d’adhérence des cellules ECM CytoSelect™ (Cell Biolabs) 

Prise de glucose dans 3T3-L1

Induction de différenciation cellulaire (tel que les préadipocytes L1 vers adipocytes différenciés

Méthodes d’induction

Interleukines, TNF, facteurs de croissance…

Activation et prolifération de cellules

Liaison au récepteur du folate dans les cellules KB

Prolifération de fibroblastes (CRL2522) et cellules endothéliales traitées avec des protéines humaines recombinantes

Activité de la transglutaminase 

Activation cellulaire mesurée par influx de Ca++ 

Expression ectopique de protéines dans des bactéries et des lignées cellulaires de mammifères

Cycle cellulaire

Détection des récepteurs à la surface des cellules et des antigènes

Protéine G trimérique via l’AMPc induite par la forskoline

FACS, ELISA

Lecture de l’iodure de propidium (IP) dans FACS

Transfections, Transformations

ELISA

Signalisation cellulaire

Essais de liaison 

Double-hybride mammifère 

IP-WB, ELISA

Interaction protéine-protéine 

 Kits Cell Biolabs 

L'expression des gènes / quantification 

mRNA, RNA, miRNA, siRNA, DNA and RNA-Plex

Essai Immunologique

Isolement des PBMC à partir de sang total

La sédimentation par gravité

Méparation magnétique

L'enrichissement de cellules T

Activation/Expansion de cellules T

Anticorps CD3+CD28 

Essai de l'inflammation

Autre

La microscopie confocale 

Particules lentiviraux 

 

Essais biochimique

Usage prévu : Ligand, liaison d’agoniste et d’antagoniste: Calcul de la valeur IC50 pour les inhibiteurs.  

Anticorps spécifiques

Insuline, Calcitonine

Essais spécifiques 

Essai / Activité

Méthodologie 

Détection de peptides dans le sérum

Absorbance après peroxydase du raifort

Détection d’anticorps dans le sérum

Fragment constant (Fc) humain d’un milieu conditionné 

HRP

ELISA-HRP

Cytokines

Détection de cytokines le sérum 

Protéines spécifiques 

Pénétration de la barrière hémato-encéphalique

Extraction de bleu d’evans / fluorescéine et protéines marquées du cerveau d’un rat

Fluorescence/Absorbance

In vitro précoce ADMETox

 

Essai 

Méthodologie 

Absorbtion

L'absorption intestinale 

cellules Caco2 

Absorption

Distribution

La liaison aux protéines plasmatiques 

FP

Métabolisme 

Stabilité métabolique 

Microsomes, les hépatocytes

Microsomes

Esterases métabolisme

Isoenzymes du CYP450 recombinantes 

CYP-Inhibition

CYP-Induction

mRNA

Toxicité

Cytotoxicité

WST1-essai de viabilité

Cardiotoxicité

Essai de liaiso-FP

Contact

smart@assays.co.il

 

Tel: +972 (0)77-300-1087

Mobil: +972 (0)54-7241-251

Location

3 Pinchas Sapir St.,

Weizmann Science Park

Ness Ziona,

7414003 ISRAEL

  • Facebook Social Icon